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作者: 少校seo 分类: 黑帽seo资讯 发布时间: 2020-01-15 12:45

admin 2020年01月15日08:47 views 0

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抗原多肽本申请是2001年6月20日提交的题为“抗原多肽”的中国专利申请01811545.4的分案申请。 本发明涉及鉴定病原微生物表达抗原肽的方法,制备含有所述多肽的疫苗所述多肽的重组方法及对所述多肽的治疗用抗体. 背景技术微生物引起的大量致死或弱病,影响着世界上数百万人。 控制微生物的现有方法有抗菌剂(抗生素)和消毒剂的应用。 这些经验证明存在问题,暴露于这些制剂环境中的显着选择性应激可产生耐药微生物,这些微生物可以避免抗菌剂的作用。 例如,最近发现微生物对三氯生物具有耐性,在家庭和工业环境中使用的消毒剂中大多添加了三氯生物。 越来越引起争议的问题是,很多重要的病原微生物使抗生素耐药株进化。 举个例子,世界上有五千多万人感染了抗性结核病( TB ) (数字来自世界卫生组织,1998 )。 过去用抗生素治疗结核病是依赖单一药物(如乙胺)的,因此产生了较高频率的耐药性。 因此,目前联合用药治疗结核病。 但是,即使联合用药进行治疗,由于对治疗结核的药物具有耐药性的菌株导致治疗失败的比例仍接近50%。 引起TB的分枝杆菌是一种慢性生长的细菌,需要长时间消灭。 因此,为了联合用药产生效果,TB患者必须每天至少服用6个月的联合用药。 患者通常每天要服用两种以上的药物,需要相当长的治疗时间。 许多患者只是间断地吃药,完全根除分枝杆菌感染的治疗程序还没有完成。 另外,TB与艾滋病感染有密切关系,TB的发生与免疫抑制有密切关系。 对抗TB的疫苗已经应用多年了。 作为可能感染TB的大量人群的安全和廉价预防手段,BCG(BCG )长期广泛应用于全球。 卡介苗是牛分枝杆菌得到的解毒疫苗。 但是,由于对TB感染的预防接种效果不大,BCG在全面控制该病方面的作用是有限的。 金黄色葡萄球菌是病原微生物对抗生素耐药的另一个例子。 金黄色葡萄球菌通常是寄生在约20-40%健康人鼻腔上皮内表面的细菌,在人的皮肤上也常见,通常不发病。 然而,在某些情况下,尤其是皮肤受损时,这种细菌可能会引起感染。 在医院,由于患者常服用外科手术或免疫抑制药物,这是一个特殊的问题。 这些患者通过他们接受的治疗容易感染金黄色葡萄球菌。 近年产生了金黄色葡萄球菌的耐药株。 甲氧西林的耐药菌株已经很普遍,这些耐药菌株也对其他一些抗生素有耐药性。 目前对金黄色葡萄球菌没有有效的预防接种措施。 在美国,每年200万人的住院感染中有13%是金黄色葡萄球菌感染引起的。 这表明沉淀0,000人感染了金黄色葡萄球菌,其中有60~80,000人死亡。 因此,金黄色葡萄球菌是重要的人类病原菌,可引起败血症、心内膜炎、关节炎、中毒性休克等多种危害生命的疾病。 其致病力取决于微生物的多样性及其病原成分的毒性。 原因是多因素,单一的原因成分不能说明特定的感染。 见Projan,s.j,Novick,R.P.(1997 )人类疾病中葡萄球菌( Crossley,k.b )着. Archer,g,eds.) pp.55-81。 在感染初期和发展阶段,微生物的需求和环境发生变化,金黄色葡萄球菌产生的病原毒素相应地发生变化。 感染开始后,病原体附着在宿主组织上很重要,骨胶原结合蛋白、纤维蛋白原结合蛋白、纤维蛋白原结合蛋白等附着在细胞表面的相关蛋白大量产生。 病原体还具有减少吞噬作用,产生妨碍细胞被循环抗体识别的因子,逃避宿主的防御系统的能力。 传染病灶通常发展成脓肿,其中细菌大量繁殖。 金黄色葡萄球菌可以通过产生一定数量的受体肽来监测自身的细胞密度。 肽的积累及其伴随的生理变化,会引起细胞营养不足,使细胞产生的病原毒素从粘附素转化为引起浸润和组织渗透的成分。 其中包括溶血素、蛋白酶和其他降解酶等。 在任何感染过程中,金黄色葡萄球菌产生的病原毒素都会随环境和生理刺激而变化。 这些刺激取决于体内的局部环境,随着感染的进行而变化。 由于对体内情况不太了解,而且某些毒素成分似乎只在体内环境中发生,因此早期的技术无法发现可能成为疫苗的成分。 现代药物历史上最重要的发展之一是疫苗的发展,预防性地保护了各种病原微生物的感染。 很多疫苗是由灭活或减毒的病原体制成,注射到个体上。 免疫个体通过体液(抗体)和细胞(溶解细胞的t细胞,CTL’s )的响应而发生反应。 例如,肝炎疫苗的制造是将病毒加热使其失活,用甲醛之类的交联剂进行处理。 减毒病原的代表性例子是活病原弱化引起的脊髓灰质炎疫苗。 然而,对特定疾病应用减毒疫苗存在忧虑。 因为对减毒过程的本质和条件缺乏病理学知识。 这个问题对特定的病毒制剂特别明显。 这是因为病毒,特别是逆转录病毒,由于具有错误倾向的复制周期,在含有病毒的基因上产生遗传变异,结果,作为疫苗使用的抗原决定簇的发生。 一种替代灭活或减毒病原体的方法是识别免疫系统特别敏感的病原体表位。 因此,病原微生物在感染过程中产生的病原毒素多数对于具有保护个体免受特定病原微生物侵害作用的疫苗的开发特别有用。 发展亚单位疫苗(疫苗免疫原是特定病原微生物表达的蛋白质或复合体片段或亚单位)成为医学研究的热点。 确定候选人开发亚基疫苗的需求,不仅是最近出现的抗生素耐药性,而且是传统化疗控制病原微生物的重大障碍。 为了确定可能用作疫苗的抗原肽,开发了很多方法。 用这个方法说明。 近年来,已知肿瘤细胞产生肿瘤细胞特异性抗原,其中有些表现在肿瘤细胞表面。 免疫系统识别这些抗原作为外来物,产生抗自身抗原的抗体,称为自身抗体或自身抗血清。 该技术之一是重组表达克隆抗原的血清学识别,简称SEREX。 一般而言,该技术包括从肿瘤组织中提取RNA,并从所有分离的RNA中选择性地富集mRNA。 mRNA用病毒逆转录酶逆转录成cDNA。 这样合成的cDNA被克隆进表达载体,转化成适当的细菌株。 转化细菌接种于营养良好的琼脂平板,在适当的生长条件下,亚克隆的cDNA在细菌细胞中通过表达载体表达。 基于噬菌体的表达载体的应用诱发了细胞的自然溶解,例如基于λ噬菌体和噬菌体的载体,在它们的溶解循环中引起细胞溶解。 释放出的多肽被转移到硝酸纤维素、尼龙等适当的膜支持体中,首先暴露于肿瘤组织分离患者得到的自身抗血清中。 免疫筛查法可用于从患者肿瘤组织中鉴定过度表达或不适当表达的基因。 我们利用这一技术鉴定感染过程中病原微生物表达的抗原肽。 感染中发生的自抗血清,筛选出基因组DNA中发生的表达文库,进行抗原的鉴定和克隆。 本发明最广泛的方面涉及在感染中由病原微生物表达的抗原肽的鉴定。 根据本发明的第一方面,(1)提供编码病原微生物的基因或基因序列的一部分的核酸库()将所述核酸文库转化/转染宿主细胞; ( iii )提供有助于表达上述转化/转染基因或基因序列的一部分的条件( iv )表达上述基因/部分基因序列的多肽与由感染上述病原微生物的动物得到的自抗血清的作用及( v )与上述自抗血清结合的多肽或部分多肽 在本发明的优选方法中,所述文库包含病原微生物的基因组DNA。 理想的上述病原微生物是细菌。 更优选细菌微生物为金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌; 粪肠球菌; 结核分枝杆菌; b族链球菌; 肺炎链球菌; 幽门螺杆菌; 淋病奈瑟菌a族链球菌; 泡螺旋体; 粗球菌; 荚膜组织细胞质菌; b型脑膜炎奈瑟菌; 弗雷志贺氏菌; 大肠杆菌; 流感病毒。 更优选所述病原微生物为葡萄球菌属细菌. 理想的病原体是金黄色葡萄球菌或表皮葡萄球菌。 在本发明的更优选实施例中,核酸文库是λ文库,理想的是λ表达文库。 根据本发明的第二方面,( I )提供( ii )核酸分子,其包含选自由i)seidno:1-13表示的DNA序列中的一个DNA序列;以及 在本发明的更优选实施例中,核酸分子是基因组DNA。 在本发明的优选实施方式中,提供了在严格杂交条件下与SEQ ID NO : 1-13所示的序列退火的分离核酸分子。 严格的杂交/漂洗条件是本领域的公知常识。 例如,核酸杂交体在0.1%xSSC、0.1% SDS下以60°C冲洗后稳定. 在本领域,如果知道核酸的序列,就可以算出最佳杂交条件。 例如,可以根据杂交核酸的GC含量来确定杂交条件。 请参阅Sambrook等人( 1989 )着的《分子克隆实验手册》。 计算给定的相同核酸分子间杂交所需条件的公式为Tm = 81.5°C +16.6Log+0.41-0.63(%甲酰胺)。 在本发明的优选实施例中,根据本发明的前述方面或实施例,多肽包括微生物感染的致病力。 更优选地,多肽是SEQ IDNO : 14_19中的至少一个或一部分。 根据本发明的第四方面,提供了一种核酸分子,其特征在于,核酸分子是适于促进由核酸分子编码的多肽的重组表达的载体的一部分。 在本发明的优选实施例中,载体是适于原核基因表达的表达载体。 或者,所述表达载体适于进行真核基因表达. 通常,适应性可以包括但不限于通过细胞特异性表达提供转录控制序列(启动子序列)。 这些启动子序列可以是细胞特异性、诱导性的或组成性的。 启动子是本领域已知的术语并且出于清楚的目的而举例说明,但不限于此示例,还描述以下特征。 增强子元件是顺式作用的核酸序列,通常位于一个基因的转录开始部位的5’端(因为增强子既出现在基因序列的3’端,也位于内含子序列的内部,所以不受位置的制约)。 增强子的功能是增加与增强子相关的基因的转录频率。 增强子的活性是与增强子元件特异性结合的转录因子(多肽)。 转录因子的结合/活性(见“真核转录因子”),David S Latchman,Academic Press Ltd,San Diego着)依赖于各种环境因子。 例如葡萄糖、脂质等中间代谢产物、光、热等环境作用因子。 启动子元件包括TATA帧和RNA聚合酶开始选择( RIS )排列,并且具有选择转印开始位置的功能。 这些序列也结合成多肽,这些多肽与其他多肽一起促进了RNA聚合酶转录起点的选择。 适应性包括提供选择标记和自动复制序列,这两者都有助于维持真核细胞或原核宿主中的载体。 自动维持的载体称为附加载体。 促进载体编码基因表达的适应性包括提供转录终止/聚腺苷酸序列。 也包括提供内核糖体进入部位( IRES ),其功能最大表达排列在二顺逆子或多顺逆子表达盒中的矢量编码基因。 这些适应性在本领域是众所周知的。 这里有关于载体构建和DNA重建的通用技术的出版物。 Sambrook等人( 1989 )着《分子克隆实验手册》、冷泉港实验室、冷泉港、NY及其参考文献请看Marston、F (1987 )着《DNA克隆技术》IRL出版的实用手册、Vol III IRL、英国牛津、《DNA克隆》 Sons,: tnc.(1994 )。 根据本发明另外一个方面,提供了一种制备上述任一方面或方面所述的多肽的方法,包括: (1)提供由本发明的载体转化/转染的细胞; ()在有利于制备所述多肽条件下培养所述细胞; 及( iii )从所述细胞或其生长环境中纯化所述多肽. 在本发明的优选方法中,载体被编码,从而向重组多肽提供促进多肽纯化的分泌信号。 根据本发明的第五方面,本发明提供了一种由载体转化或转染的细胞或细胞系。 在本发明的优选实施例中,所述细胞是原核细胞。 或者,所述细胞是选自真菌、昆虫、两栖类、哺乳动物、植物真核细胞. 根据本发明的另一方面,提供了一种包括本发明多肽中至少一种的疫苗。 理想上,疫苗还包括载体和/或佐剂。 载体和佐剂表现如下。 一些多肽或多肽抗原含有b细胞表位,但没有t细胞表位。 多肽/多肽加入t细胞表位,或多肽/多肽与含多个t细胞表位的免疫原性载体蛋白结合,可大幅度增强血兰蛋白和破伤风毒素等免疫应答。 结合物由抗原呈递细胞摄取、加工,seo优化培训,以人类白细胞抗原( HLA’s )ⅱ类分子呈递。 在t细胞的帮助下,这将来自载体表位的t细胞特异性传递给原始抗原肽/肽具有特异性的b细胞。 这会增加抗体的产生、分泌和同源性。 佐剂是通过调节免疫细胞的活性,可以增加对抗原的特异性免疫应答的物质或程序。 佐剂的例子包括共刺激分子的兴奋抗体、氟沙星、塞尔维亚二肽和脂质体。 因此,佐剂是免疫调节剂。 载体是免疫原性分子,与第二分子结合后对后者的免疫应答增强。 本发明的另一个方面提供了一种通过向动物施用本发明的多肽或其一部分或本发明的疫苗使动物产生抵抗病原微生物的免疫力的方法。 在本发明的优选方法中,动物是人。 疫苗和抗原肽优选通过静脉内注射、肌肉注射、皮下注射等直接注射来接种。 而且,疫苗和抗原肽也许可以口服给药。 疫苗最好能抵抗金黄色葡萄球菌。 疫苗也可能抵抗表皮葡萄球菌。 显然,疫苗和抗原肽对于控制和减轻人以外的动物病情也是有效的。 例如家庭宠物、家畜和马。 根据本发明的另一方面,还提供了一种抗体或其有效的结合部分,其结合了本发明的多肽中的至少一种。 在本发明的优选实施方式中,抗体是对多肽具有特异性的多克隆或单克隆抗体。 或者,抗体是通过重组方法产生的嵌合抗体,包括抗体的可变区域和人类抗体的不变或一定区域。 在本发明的另一个可替换实施方式中,抗体是通过重组产生的人源抗体,并且是固定区域( c )与可变区域( v )的引线框架之间的结合,固定区域( c )是抗体的互补确定区域和人抗体的一种。 优选地,向抗体授予包括常规标记或标记的标记,例如放射性和/或荧光和/或表位标记或标记。 人源于该多肽单克隆抗体优选是来自适于转化或转染原核细胞或真核细胞的表达载体的融合多肽。 抗体又称免疫球蛋白,是外源分子(抗原)的特异性蛋白质分子。 免疫球蛋白( Ig )是包含多肽链对的结构相关蛋白,一对是轻( l ) (低分子量)链(κ或λ),一对是重( h )链( y,α,μ,δ和ε),所有4条链都通过二硫键结合。 重链和轻链都有结合抗原的区域,在Ig分子间高度可变。 此外,重链和轻链包括不可变的或固定的区域。 光链包含两个领域。 羧基末端结构域在某种类型的轻链中大致相同,称为“恒定”( c )区域。 氨基末端结构区在轻链和轻链之间变化,构成抗体的结合部位。 因为可变性,所以称为可变( v )区域。 坛分子的重链分为几种类型,α,μ,δ,ε,y (其中有几种子类型)。 组装的Ig分子包括由相同的两条重链和轻链组成的一个或多个单元,从该重链中获得名称。 Ig这样分成五种类型,即IgA、IgM、IgG、IgE和IgG (四个子类型,例如IgGl、IgG2、IgG3和IgG4)。 关于抗体结构及其不同功能的更详细解释,可参考《抗体应用:一本实验室手册》,由冷泉港实验室出版。 嵌合抗体是重组抗体,其中小鼠或大鼠抗体的所有可变区域都与人类抗体的一定区域相结合。 人源抗体是重组杂交抗体,融合了啮齿类抗体可变区域的互补决定区域和人抗体可变区域的框架区域。 人类抗体也在使用。 互补决定区( CDRs )位于抗体重链和轻链的n端结构区,可变区的主要变化集中在CDRs上。 这些区域构成位于抗体分子表面的环状结构。 这些环状结构在抗体和抗原之间提供了结合表面。 非人类动物的抗体可引起外来抗体的免疫应答,从血液循环中被清除。 注射到人体活体的嵌合抗体和人源抗体具有较弱的抗原性,重组杂交抗体减少啮齿类(即异种)抗体的量,人体抗体区域不产生免疫应答。 减弱了对抗体的免疫应答,减少了抗体的去除。 这显然是用治疗性抗体治疗人类疾病所必需的。 人源抗体设计为具有较少的“异种”抗体区域,因此人源抗体是比嵌合抗体弱的免疫原。 本发明的其他方面提供了一种可应用于依照本发明表达人或相机的抗体的载体。 本发明还提供了本发明的人体或照相机的编码抗体的载体中的转化或转染的细胞或细胞系。 本发明还提供(1)用含有编码本发明人或相机抗体的核酸分子的载体转化或转染的细胞,(2)用含有编码本发明人或相机抗体的核酸分子的载体转化或转染的细胞 及( iii )从所述细胞或其生长环境中纯化所述抗体. 本发明还提供产生上述单克隆抗体的杂交瘤细胞系。 本发明还提供一种用杂交瘤细胞系制备本发明的单克隆抗体的方法。 本发明还提供一种生产本发明单克隆抗体杂交瘤细胞系的方法,该方法包括:使用含有至少一种具有SEQ.ID No 14-19所示氨基酸序列的多肽或其片段的免疫原来免疫具有免疫活性的哺乳动物 将免疫免疫活性动物的淋巴细胞与骨髓肿瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的iii )根据工序( I )中与氨基酸序列的结合活性,筛选工序( ii )中杂交瘤细胞产生的单克隆抗体的iv )培养杂交瘤细胞的增殖和/或 以及ν)从培养上清中回收单克隆抗体。 上述具有免疫活性的哺乳动物优选为小鼠。 或者,上述具有免疫活性的哺乳动物是大鼠。 使用杂交瘤细胞产生单克隆抗体在本领域广为人知。 产生单克隆抗体的方法由Kohler和Milstein (自然256,495-497 ( 1975 ) )、Donillard和Hoffman (关于《免疫学概述》V.II的《关于杂交基本原理》Schwartz编辑了1981,参考文献)发表。 本发明还采用抗体制备药物以治疗金黄色葡萄球菌引起的败血症、食物中毒或皮肤损伤。 为了治疗表皮葡萄球菌引起的败血症、腹膜炎或心内膜炎,本发明还使用本发明的抗体制备药物。 显然,本发明方法鉴定的多肽促进了可用于病原体感染的疾病,如败血症、结核病、细菌相关食物中毒、血液感染、腹膜炎、心内膜炎、脓毒症、脑膜炎、肺炎、胃溃疡、淋病、链球菌相关中毒休克、坏死性筋膜炎、脓庙病、组织细胞菌病、莱姆病、胃肠炎、痢疾、志贺菌病等的治疗性抗体的生产。 如上所述,病原微生物引起广泛的不同类型的疾病。 例如,不限于下表所示的病原微生物和由此引起的疾病。

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admin 2019年12月24日06:51 views 0

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多用拖把的本实用新型与多用拖把有关。 根据国际专利分类表( IPC ),人类生活需求部门、个人或家庭用品部门、家具、家用物品或设备的种类、家用洗涤或清扫、一般吸尘器的种类、地板、地毯、家具、墙壁或墙壁的用具组属于洗涤、清洗清扫中拖把组的技术领域。 号码是A47L13/20。

目前地板、地毯、家具、墙壁和清洁工具大组洗涤、清洁中拖把组的技术对很多拖把的需求作出了有效的努力,seo观察,设计过很多优秀的技术方案。 正如1996年中国专利局公开的周经渊申报的那样,授权公告号为CN2233222Y,中国专利号( ZL )为95237012.3号的实用新案名为“连接螺纹拖布”的实用新型专利,是采用的技术方案。 地板、地毯、家具、墙壁和墙壁清洁工具大组清洁中拖把组技术,清洁是一项非常有价值的发明,有效地解决了拖把扭头的问题。 但是,还不够。 不能用拖把扫地,不能擦玻璃,也不能拖地板。

本实用新型的目的是提供许多拖把。 解决拖把扫地、擦玻璃、拖地的问题。

本实用新型的目的,是通过多用拖把实现的。 主要由密封头、手柄、伸缩杆、扫帚头、扫帚毛、大拖头、百洁布、小拖头构成。 其主要部件的手柄、伸缩杆为圆管形状,以塑料为材料,通过注塑加工制造而成。 扫帚头为方形空洞形状,以塑料为材料,注塑加工制成。 该圆管形状的伸缩杆通过过渡的配合安装在圆管形状的手柄上。 形成一个圆管形状的把手长度变动结构。 该圆形密封头通过螺纹连接安装在圆管形状的手柄上。 形成圆形水密封结构。 方型腔形状的扫帚头通过螺纹结合安装在圆管形状的伸缩杆上。 是扫地的构造。 该方形拖把通过螺纹结合安装在圆管形状的伸缩杆上。 形成方形玻璃擦洗和拖把结构。 那个密封头用螺钉紧固方法作用在把手上。 密封头满足密封水玻璃和拖把的要求。 扫帚头和大拖把,小拖把用螺钉紧固方法作用于伸缩杆。 完成扫地、擦玻璃、拖地的任务。 这样,达到了本实用新型的目的。

本实用新型具有清洗原始地板、地毯、家具、墙壁和墙壁衬垫的大组工具,与清洗清扫中拖把组的技术相比有三个优点和改进,第一,本实用新型在技术方案中设计了扫帚头,解决了清扫中使用的问题,第二, 本实用新型在技术方案中设计了大拖把和小拖把,解决了玻璃擦拭和拖把可用问题,第三,本实用新型在权利要求中设计了伸缩杆,解决了可以改变把手长度的问题。 用拖把扫地、擦玻璃、拖地板都能更有效地解决问题。

提出了一种本实用新型结构示意图: 1是本实用新型多用途拖布的整体外观安装结构示意图;2是本实用新型多用途拖布的手柄连结结构示意图;3是本实用新型多用途拖布的扫刷头结构示意图 品号说明: 1密封头2把手3伸缩杆4刷头5刷毛6大拖布7百洁布8小拖布下结合,对本实用新型进一步说明:如所示,本实用新型拖布较多。 主要由密封头1、手柄2、伸缩杆3、扫帚头4、扫帚毛5、大拖布头6、百洁布7、小拖布头8构成。 其主要部件的手柄2、伸缩杆3为圆管形状,以塑料为材料,通过注塑成型加工制造。 其扫帚头4是方形的空洞形状,是以塑料为材料,通过注射成型加工制成的。 该圆管形状的伸缩杆3以过渡的配合安装在圆管形状的把手2上。 形成一个圆管形状的把手长度变动结构。 该圆形状的密封头1通过螺纹结合安装在圆管形状的把手2上。 形成圆形水密封结构。 方型腔形状的扫帚头4通过螺钉结合安装在圆管形状的伸缩杆3上。 是扫地的构造。 该三角形的拖布6通过螺纹结合安装在圆管形状的伸缩杆3上。 形成方形玻璃擦洗和拖把结构。 该密封头1通过螺钉紧固作用于手柄2。 密封头1满足密封水玻璃和拖布的要求。 其扫刷头4和大拖布头6、小拖布头8通过螺钉紧固方法作用于伸缩杆3。 完成扫地、擦玻璃、拖地的任务。 这样,达到了本实用新型的目的。 可以用拖把扫地,擦玻璃,拖地板。

以下,通过实施例对本实用新型进行更详细的叙述:在实施例1、实施例中,扫地时如果在伸缩杆3上安装扫刷头4,则成为扫地用的扫刷。 地面灰尘过多的情况下,打开密封头1,向把手2内注入水,扫地时灰尘飞扬,可以防止污染空气。

在实施例2、实施例中,在玻璃擦拭中使用的情况下,在伸缩杆3上安装小的拖布8,打开密封头1而向把手2加水,则能够进行玻璃擦拭作业。 同样安装大拖把6。 可以拖地板,擦玻璃时伸缩杆3可以伸长,有时把手的长度不同。 由此,可以达到本实用新型的目的。

实现本实用新型的最佳方案是以塑料为材料,利用环保设备厂的基本设备,通过注塑成型批量生产,提供家庭生活和环保界的需求,可以更好地实现本实用新型的实用价值和经济价值。

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